书房内,吴哲已经写了好几张纸了。一段时间的在思考,也让吴哲对新型的基因测绘方法有了个比较完整的想法,至于说行不行的通,还需要其他学科的配合实验后才能知道。只是现在只是写一份课题报告来论证自己提出的方法是有可行性的。
这次他完全是摒弃了传统的Sanger双脱氧链终止法。采用了一种被他称呼为:dream基因自检法。中文名叫做:梦之基因自检法。
原理就是:通过四种不同的染色剂,对标四个碱基。通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'''端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物,使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳。由于分子大小不同,在毛细管电泳中的迁移率也不同,当其通过毛细管读数窗口段时,激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测,激发的荧光经光栅分光,以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光,并在CCD摄影机上同步成像,分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列,从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。
原理说穿了可能很简单,可要制造出来,就需要多学科配合了。涉及到生物,化学,计算机,物理光学等学科。可以说是数理化生计算机的全面应用了。
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